Kit d'essai de Furaltadone (AMOZ) ELISA pour la crevette/viande/Hepar de miel de détection

Furaltadone (AMOZ) ELISA Test Kit

Description de produit

^{Le ™Furaltadone de} REAGEN (AMOZ) ELISA Test Kit fournit un immunoessai concurrentiel d'enzymes pour l'analyse quantitative du furaltadone dans les poissons, crevette, viande (poulet, boeuf, porc et hepar), oeufs, pierre à aiguiser.

• Récupération rapide (4 heures) et élevée (80 - 105%), et méthodes rentables d'extraction pour différents échantillons.

• Sensibilité élevée (0,05 ng/g ou ppb) et basse limite de détection (0,1 ng/g ou ppb) pour différents échantillons.

• Reproductibilité élevée.

• Une analyse rapide d'ELISA (moins de 1 heures indépendamment du nombre d'échantillons).

Aperçu de procédure

La méthode est basée sur une analyse colorimétrique concurrentielle d'ELISA. L'AMOZ-BSA a été enduit dans les puits de plat. Pendant l'analyse, l'échantillon et l'anticorps d'AMOZ sont ajoutés avec l'anticorps secondaire, étiqueté avec de l'enzyme de peroxydase. Si le résidu d'AMOZ est présent dans l'échantillon, il concurrencera pour l'anticorps d'AMOZ, empêchant de ce fait l'anticorps de l'attache à l'AMOZ-BSA attachée au puits. L'intensité en résultant de couleur, après addition du substrat de HRP (TMB), a des relations inverses avec la concentration de résidu d'AMOZ dans l'échantillon.

Kit Contents, stockage et durée de conservation

^{Le ™Furaltadone de} REAGEN (AMOZ) ELISA Test Kit a la capacité pour 96 déterminations ou l'essai de 42 échantillons en double (assumant 12 puits pour des normes). Renvoyez tous les microwells inutilisés au sac d'aluminium et rescellez-les avec du déshydratant fourni dans le paquet original. Stockez le kit à 2-8°C*. La durée de conservation est de 12 mois où le kit est correctement stocké.

* si vous ne prévoyez pas d'employer le kit pour plus de 1 mois, magasin Antibody#1 et anticorps HRP-conjugué #2 à -20°C ou dans un congélateur.

Sensibilité (limite de détection)

Spécificité (activité hétérospécifique)

Matériaux requis non équipés de kit

lecteur du plat 1.Microtiter (450 nanomètre)

2.Incubator

mélangeur 3.Tissue (par exemple homogénisateur d'Omni TissueMaster)

gaz du vaporisateur 4.Rotary ou de l'azote

mélangeur 5.Vortex (par exemple mélangeur de vortex de Gneie de VWR)

pipettes de 6,10, 20, 100 et 1000 ml

pipette 7.Multi-channel : 50-300 ml (de facultatif)

acétate 8.Ethyl

9.0.1 M K2HPO4

10.n-Hexane (ou n-heptane)

NaOH de 11.1M

HCL de 12.1M

Avertissements et précautions

• Les normes contiennent Furaltadone. Poignée avec soin particulier.

• N'employez pas le kit après la date d'échéance.

• N'entremêlez pas les réactifs de différents kits ou les sorts excepté des composants avec le même numéro de la pièce dans leurs dates d'échéance. LES ANTICORPS ET LES PLATS SONT KIT ET LOT-SPECIFIC.

• Essayez de maintenir une température de laboratoire de 20°-25°C (68°-77°F). Le fonctionnement Avoid analyse sous ou près des évents, car ceci peut causer le refroidissement, le chauffage et/ou l'évaporation excessifs. En outre, ne courez pas les analyses à la lumière du soleil directe, comme ceci peut causer la chaleur excessive et l'évaporation. Des dessus froids de banc devraient être évités en plaçant plusieurs couches de serviette de papier ou d'un autre matériel d'isolation sous les plats d'analyse pendant l'incubation.

• Assurez-vous que vous employant distillez seulement ou l'eau désionisée puisque la qualité de l'eau est très importante.

• En introduisant à la pipette des échantillons ou des réactifs dans un plat de microtitre vide, placez les astuces de pipette dans le coin inférieur du puits, établissant le contact avec du plastique.

• Des incubations des plats d'analyse devraient être chronométrées aussi avec précision comme possible. Soyez cohérent en ajoutant des normes au plat d'analyse. D'abord et puis ajoutez vos normes vos échantillons.

• Ajoutez les normes pour plaquer seulement dans l'ordre de la basse concentration à la forte concentration car ceci réduira au minimum le risque de compromettre la courbe standard.

• Frigorifiez toujours les plats dans les sacs scellés avec du déshydratant pour maintenir la stabilité. Empêchez la condensation de former des plats en leur permettant d'équilibrer à la température ambiante (20 – 25°C/68 – 77°F) tandis que dans l'emballage.

PRÉPARATION TÉMOIN

Soyez sûr que des échantillons sont correctement stockés. Généralement des échantillons devraient être frigorifiés au forno 2-4°C plus de 1-2 jours. Échantillons de gel à un minimum de -20°C s'ils doivent être stockés pendant une plus longue période. Des échantillons congelés peuvent être dégelés aux temps de pièce (20 – 25°C/68 – 77°F) ou dans un réfrigérateur avant emploi.

Poissons

• Mélange 1 g de l'échantillon homogénéisé avec 0,5 ml de tampon d'extraction témoin 1X, 3,5 ml d'eau distillée, 0,5 ml de 1 M HCl et 20 ml de 50 millimètres 2-Nitrobenzaldehyde par vortexing pendant 30 secondes.

• Incubez à 50°C -55°C pendant 3 heures. Vortex l'échantillon pendant 5 secondes chaque heure pendant l'incubation.

• Ajoutez 5 ml de 0,1 M K2HPO4, 0,4 ml de NaOH de 1 M et 6 ml d'acétate éthylique, vortex pendant 2 minutes.

• Centrifugeuse à 4 000 x g pendant 5 minutes à la température ambiante (20 – 25°C).

• Transfert 3 ml du surnageant d'acétate éthylique (correspondant à 0,5 g d'échantillon original) dans une nouvelle fiole (F évitent la couche aqueuse inférieure ! Si souillé avec la couche inférieure, centrifugez l'acétate éthylique extrait pendant 5 minutes à 4 000 x g encore et obtenez la couche organique supérieure). Au cas où l'émulsion se produisait et la couche supérieure d'acétate éthylique était moins de 3 ml, incubez l'échantillon sur le bain d'eau pendant 3 minutes à 85°C.Use un evaporateur rotatif pour sécher l'échantillon sur un bain d'eau 60-70°C à pression réduite. Alternativement, l'échantillon peut être séché en soufflant le gaz d'azote sur un bain d'eau 60-70°C.

• Dissolvez le résidu sec dans 1 ml de n-hexane (ou de n-heptane).

• Ajoutez 1 ml de 1 tampon d'extraction témoin deX, vortex l'échantillon pendant 2 minutes.

• Centrifugez l'échantillon à 4 000 x g pendant 10 minutes à la température ambiante (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Employez 50mL de la couche aqueuse inférieure par puits pour l'analyse.

Note : Facteur de dilution : 2. Pour éviter le fond élevé, on lui recommande qu'un échantillon vide dissolvant soit préparé en parallèle, commençant par la réduction de 3 ml d'acétate éthylique à sec et continue la procédure d'extraction de repos. Soustrayez le résultat du contrôle dissolvant des résultats d'échantillon.

Crevette /Meat/Hepar

• Mélange 1 g de l'échantillon homogénéisé avec le tampon d'extraction témoin de 0,5 ml 1X, 3,5 ml d'eau distillée, 0,5 ml de 1 M HCl et 20 ml de 50 millimètres 2-Nitrobenzaldehyde par vortexing pendant 30 secondes.

• Incubez at50°C -55°C pendant 3 heures. Vortex l'échantillon pendant 5 secondes chaque heure pendant l'incubation.

• Ajoutez 5 ml de 0,1 M K2HPO4, 0,4 ml de NaOH de 1 M et 6 ml d'acétate éthylique, vortex pendant 5 minutes.

• Centrifugeuse à 4 000 x g pendant 5 minutes à la température ambiante (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Transfert 3,0 ml du surnageant d'acétate éthylique (correspondant à 0,5 g d'échantillon original d'oeufs) dans une nouvelle fiole (F évitent la couche aqueuse inférieure ! Si souillé avec la couche inférieure, centrifugez l'acétate éthylique extrait pendant 5 minutes à 4 000 x g encore et obtenez la couche organique supérieure). Employez un evaporateur rotatif pour sécher l'échantillon sur un bain d'eau 60-70°C à pression réduite. Alternativement, l'échantillon peut être séché en soufflant le gaz d'azote sur un bain d'eau 60-70°C.

• Dissolvez le résidu sec dans 1 ml de n-hexane (ou de n-heptane).

• Ajoutez 1 ml de tampon et de vortex d'extraction témoin 1X l'échantillon pendant 2 minutes.

• Centrifugez l'échantillon à 4 000 x g pendant 10 minutes à la température ambiante (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Employez 50 ml de la couche aqueuse inférieure par puits pour l'analyse.

Note : Facteur de dilution : 2. Pour éviter le fond élevé, on lui recommande qu'un échantillon vide dissolvant soit préparé en parallèle, commençant par la réduction de 3 ml d'acétate éthylique à sec et continue la procédure de repos. Soustrayez le résultat du contrôle dissolvant des résultats d'échantillon.

Oeuf

• Mélange 1 g de l'échantillon d'oeufs avec 0,5 ml de tampon d'extraction témoin 1X, 3,5 ml d'eau distillée, 0,5 ml de 1 M HCl et 20 ml de 50 millimètres 2-Nitrobenzaldehyde par vortexing pendant 2 minutes.

• Incubez à 50°C -55°C pendant 3 heures. Vortex l'échantillon pendant 5 secondes chaque heure pendant l'incubation.

• Ajoutez 5mL de 0,1 M K2HPO4, 0,4 ml de NaOH de 1 M et 6 ml de l'acétate éthylique, vortex 5 minutes à la vitesse maximum.

• Centrifugeuse à 4 000 x g pendant 10 minutes à la température ambiante (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Transfert 3,0 ml du surnageant d'acétate éthylique (correspondant à 0,5 g d'échantillon original de miel) dans une nouvelle fiole (F évitent la couche aqueuse inférieure ! Si souillé avec la couche inférieure, centrifugez l'acétate éthylique extrait pendant 5 minutes à 4 000 x g encore et obtenez la couche organique supérieure). Employez un evaporateur rotatif pour sécher l'échantillon sur un bain d'eau 60-70°C à pression réduite. Alternativement, l'échantillon peut être séché en soufflant le gaz d'azote sur un bain d'eau 60-70°C.

• Dissolvez le résidu sec dans 1 ml de n-hexane (ou de n-heptane).

• Ajoutez 1 ml de 1 tampon et vortex d'extraction témoin deX pendant 2 minutes.

• Centrifugez l'échantillon à 4 000 x g pendant 10 minutes à la température ambiante (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Use50 ml de la couche aqueuse inférieure pour l'analyse.

Note : Facteur de dilution : 2. (1) après l'évaporation de l'extrait d'acétate éthylique, le résidu en résultant n'est pas complètement dissous. Cependant, le taux de récupération ne sera pas compromis (>80%). (2) pour cette préparation, nous recommandons d'employer la norme 0,5 ng/g ou le ppb comme valeur coupée pour les échantillons positifs puisque les échantillons négatifs pourraient montrer des effets de fond considérables (dans certains cas entre les normes 0,05 ng/g et 0,15 ng/g).