La streptomycine ELISA Test Kit de ™ de REAGEN est un immunoessai concurrentiel d'enzymes pour l'analyse quantitative de la streptomycine et de la dihydrostreptomycine en alimentation, miel, rein, foie, viande (boeuf, poulet et porc), lait, sérum et urine.
Type témoin |
Limite de détection (ng/g ou ppb) |
Alimentation |
5 |
Miel |
2 |
Viande/foie/rein |
5 |
Lait |
1 |
Lait en poudre |
1 |
Sérum/urine |
0,5 |
Analytes |
Activité hétérospécifique (%) |
Streptomycine |
100 |
Méthodes sans réactif rapides (10 - 30 minutes), et organiques d'extraction pour différents échantillons avec récupération de haute (75 - 115%).
Sensibilité élevée (0,05 ng/g ou ppb) et basse limite de détection (1 ng/g ou ppb pour la viande et le lait).
Reproductibilité élevée.
Une analyse rapide d'ELISA (moins de 2 heures indépendamment du nombre d'échantillons).
La méthode est basée sur une analyse colorimétrique concurrentielle d'ELISA. L'anticorps de streptomycine a été enduit dans les puits de plat. Pendant l'analyse, l'échantillon est ajouté avec le conjugué de peroxydase de streptomycine-raifort. Si le résidu de streptomycine est présent dans l'échantillon, il concurrencera pour l'anticorps de streptomycine, empêchant de ce fait la streptomycine-HRP de lier à l'anticorps attaché au puits. L'intensité en résultant de couleur, après addition du substrat de HRP (TMB), a des relations inverses avec la concentration de résidu de streptomycine dans l'échantillon.
Marquez les différentes bandes qui seront employés et des réactifs de partie aliquote comme exemple suivant :
Composant |
Volume par réaction |
24 réactions |
Anticorps #1 de streptomycine |
50 ml |
1,2 ml |
Anticorps HRP-conjugué #2 |
50 ml |
1,2 ml |
solution du lavage 1X |
2,0 ml |
48 ml |
Tampon d'arrêt |
100 ml |
2,4 ml |
Substrat de TMB |
100 ml |
2,4 ml |
Ajoutez 50uL des normes de chaque streptomycine en double dans différents puits (F ajoutent des normes pour plaquer seulement dans l'ordre de la basse concentration à la forte concentration).
Ajoutez l'UL 50 de chaque échantillon en double dans différents puits témoin.
Ajoutez l'UL 50 de l'anticorps #2 HRP-Conjuguer et 50mL l'anticorps #1 à chaque puits, se mélangent bien en basculant doucement le plat manuellement pour 1 minute.
Incubez le plat pendant 30 minutes à la température ambiante (20 – 25°C/68 – 77°F) (le F évitent la lumière du soleil directe et les dessus froids de banc pendant l'incubation. Couvert du plat de microtitre tandis que l'incubation est recommandée).
Lavez le plat 5 fois avec l'UL 250 de la solution du lavage 1X. Après le dernier lavage, inversez le plat et tapez doucement le sec de plat sur les serviettes de papier (F exécutent la prochaine étape juste après des lavages de plat. Ne laissez pas le plat aérer sec entre les étapes de fonctionnement).
Ajoutez l'UL 100 du substrat de TMB. Chronométrez la réaction juste après ajouter le substrat. Mélangez la solution en basculant doucement le plat manuellement pour 1 minute tout en incubant (le F ne mettent aucun substrat de nouveau au conteneur original pour n'éviter aucune contamination potentielle. N'importe quelle solution de substrat montrant la coloration est indicative de la détérioration et devrait être jetée. Couvert du plat de microtitre tandis que l'incubation est recommandée).
Après incubation pendant 15 minutes à la température ambiante (20 – 25°C/68 – 77°F), ajoutez l'UL 100 du tampon d'arrêt pour arrêter la réaction enzymique.
Lisez le plat suivant dès que possible l'addition du tampon d'arrêt sur un lecteur de plat avec la longueur d'onde de 450 nanomètre (F avant la lecture, emploient un chiffon non pelucheux sur le fond du plat pour s'assurer qu'humidité ou empreinte digitale n'interfère pas les lectures).
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